培養基的滅菌及使用

1.每次配置時，要注意其生產日期是否在保質期內，查看其開瓶日期及瓶口密封性，保證其未變質，并且未吸潮。

2.培養基配置時，稱量要準確，包括鹽水的分裝要準確。

3.一定要保證現配制現滅菌，未滅菌的配好培養基不能長時間放置，更不可隔夜。

4.滅菌時要保證恒溫、恒壓，同時要保證有效滅菌時間。

5.滅菌過的培養基要冰箱保存，可保存一周，一般不超過 3 天。而且要遵循“先入先出”原則，先配制的要先使用。

6.在使用時，要根據當班次的使用量，用水浴鍋先將培養基溶化為液態，然后及時調低水域溫度(先化好的可從水域取出，放在水浴鍋鍋蓋上)待用，千萬不可長時間使培養基處于高溫狀態。

7.做產品微生物檢測時，傾倒培養基溫度在 45℃左右，不可過燙，避免將菌燙死;也不可過涼，化好的培養基又結塊凝固，不便于觀察結果。

8.每瓶培養基均要做空白。

9.盡量集中做樣，避免頻繁打開同一瓶培養基瓶塞，增大培養基的污染幾率，出現誤差結果。

10.培養基剩余過少時，可先將其傾倒成空白用板。

做樣環境的維持

一、大環境(房間)

1.做樣時，窗戶和空調要關閉，或用酒精對房間進行噴霧消毒，避免房間內空氣流通影響超凈臺內部環境(最好在有通排風系統的恒溫恒濕無菌間進行操作)。

2.如果在原來的原料微生物檢測室進行做樣，要定期開啟紫外燈，對房間進行殺菌。

二、小環境(超凈臺)

1.定期清潔初效過濾器，要及時更換。

2.做樣前，將超凈臺內部進行清潔，用 75%酒精進行擦拭消毒，并提前半小時將超凈臺紫外燈打開，對超凈臺內部環境進行殺菌。

3.關紫外燈，開風機，調整合適進風量，風量不可過低。

4.每次做樣后，要對超凈臺內部進行清理、清潔，并用75%酒精進行擦拭消毒。

5.紫外燈根據其使用壽命要及時更換。

6.做樣同時，要做上相應菌落檢測的環境空白。

7.做樣區域的選擇：

①一般在距離超凈臺外沿的 1/3-2/3 區域進行無菌操作;

②要在酒精燈火焰的外焰保護區域進行操作。

工器具的潔凈度

1.玻璃器皿：采用干熱滅菌方式進行滅菌。

2.做樣用剪刀、勺子等物品要做到做樣專用，不可與其它操作器具混用，使用時，先用75%酒精消毒，再采用灼燒方式進行滅菌。

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